PCR實驗室設(shè)置和工作要求

目的：為了防止樣品之間的污染和避免基因擴增產(chǎn)物污染新的基因擴增體系，使本臨床基因擴增檢驗實驗室滿足頒布的《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設(shè)置標準》的要求。本程序是臨床基因擴增檢驗室設(shè)置及管理的核心內(nèi)容。

適用范圍：PCR實驗室的設(shè)備、設(shè)施、工作流程及日常工作的管理。

職責：由PCR實驗室制定程序文件，實驗室專業(yè)技術(shù)人員執(zhí)行，檢驗科主任負責檢查實施。

設(shè)置規(guī)程：PCR實驗室的工作人員須遵守本實驗室的規(guī)則，非本室人員參觀或進行科研活動等需要進入臨床基因擴增檢驗實驗室的，須經(jīng)實驗室負責人允許，并嚴格遵守本規(guī)程的各項規(guī)定。PCR實驗室分為四個分隔開的工作區(qū)域:試劑準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)。PCR實驗室的各個分區(qū)有專用的實驗設(shè)備、儀器，有明顯的標識或色標識，不得混用。進入各工作區(qū)域須嚴格按照單一方向進行，即試劑準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→產(chǎn)物分析區(qū)，避免發(fā)生交叉，在各工作區(qū)域使用不同顏色的工作服。中凈環(huán)球凈化可提供潔凈車間、GMP實驗室等的咨詢、規(guī)劃、設(shè)計、施工、安裝、改造等配套服務(wù)。

工作總則：PCR實驗室工作人員應(yīng)具備醫(yī)學、分子生物學專業(yè)知識，并接受過PCR實驗的基本知識和技能培訓。PCR實驗室各區(qū)的實驗物品（含加樣器、槍頭等）不得混用，須貼上標簽予以區(qū)別。實驗室技術(shù)人員須嚴格按照PCR實驗室操作程序進行，包括實驗室擦洗、臺面消毒、離心管與吸頭滅菌、儀器使用等。工作人員進入實驗室前須更換本區(qū)所用的工作服，不得混用，當工作者離開工作區(qū)時，不得將各區(qū)特定的工作服帶出，勤換洗工作服。實驗過程中使用過的廢棄移液槍頭和EP管應(yīng)立即浸泡于裝有10%次氯酸鈉的容器中過夜，第二日早晨再倒入盛污染物品的垃圾桶中，由專人定期交醫(yī)用垃圾處理中心處理。工作結(jié)束后，對該區(qū)的工作臺面用10%次氯酸鈉液進行消毒，然后用75%乙醇清潔，再用紫外線殺菌車照射60分鐘；地面用10%次氯酸鈉液進行消毒清潔；打開固定紫外燈消毒60分鐘，每天下班前應(yīng)關(guān)好水、電、門、窗。實驗室的清潔應(yīng)按試劑貯存和準備區(qū)至擴增產(chǎn)物分析區(qū)的方向進行，不同的實驗區(qū)域應(yīng)有其各自的清潔用具以防止交叉。實驗中若發(fā)生標本破裂或外泄時，應(yīng)立即停止工作，將破裂標本放入醫(yī)用垃圾桶，用10%次氯酸鈉溶液消毒污染處，再用75%乙醇擦拭干凈，一并用紫外燈照射30分鐘后開始工作。定期校準和維修儀器設(shè)備。實驗室嚴禁吸煙、進食以及化妝等，不得將私人物品帶入。實習及進修人員須在帶教老師的指導(dǎo)下，才能在本區(qū)進行實驗操作。