無菌車間標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)要求

  無菌車間應(yīng)設(shè)有無菌操作間和緩沖間，無菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí)，室內(nèi)溫度保持在20-24℃，濕度保持在45%-60%，超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)；應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染；嚴(yán)防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染，已污染者應(yīng)停止使用；無菌車間應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證潔凈度符合要求；工作人員進(jìn)入無菌車間前，必須用消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用工作服、鞋、帽子、口罩和手套，方可進(jìn)入無菌車間進(jìn)行操作；無菌車間使用前必須打開紫外線燈等輻照滅菌30min以上，并且同時(shí)打開超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)，操作完畢，應(yīng)及時(shí)清理無菌車間，再用紫外線等輻照滅菌20min；供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開啟，以防污染，檢查前用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的酒精棉球消毒外表面。

  吸取菌液時(shí)，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管；接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物；帶有菌液的吸管、試管、培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)在浸泡在盛有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的來蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒，24H后取出沖洗；凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。無菌車間應(yīng)每月檢查菌落數(shù)，在超凈工作臺(tái)開啟的狀態(tài)下，取內(nèi)徑90mm的無菌培養(yǎng)皿若干，無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15ML，放至凝固后，倒置于30-35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48H，證明無菌后，取平板3-5個(gè)，分別放置工作位置的左、中、右等處，開蓋暴露30min后，倒置于30-35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48H，取出檢查，100級(jí)潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個(gè)菌落，10000級(jí)潔凈區(qū)平均不得超過3個(gè)菌落，如超過限度，應(yīng)對(duì)無菌車間進(jìn)行徹底消毒，直至重復(fù)檢查合乎要求為止。中凈環(huán)球凈化可提供無菌車間、無菌室的咨詢、規(guī)劃、設(shè)計(jì)、施工、安裝、改造等配套服務(wù)。

  在獲得了無菌環(huán)境和無菌材料后，還要保持無菌狀態(tài)，才能對(duì)某種特定的已知微生物進(jìn)行研究或利用它們的功能，否則外界的各種微生物很容易混入；防止污染是微生物學(xué)工作中十分關(guān)鍵的技術(shù)，一方面是徹底滅菌，另一方面防止污染，這是無菌技術(shù)的兩個(gè)方面；無菌車間外要設(shè)一個(gè)緩沖間，緩沖間的門和無菌車間的門不要朝向同一方向，以免氣流帶進(jìn)雜菌，室內(nèi)裝備的換氣設(shè)備必須有空氣過濾裝置；無菌車間的地面、墻壁必須平整，不易藏污納垢，便于清洗，工作臺(tái)的臺(tái)面應(yīng)該處于水平狀態(tài)，工作人員進(jìn)入無菌車間應(yīng)穿滅過菌的服裝、戴帽子。

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