基因工程凈化車(chē)間抗體的分離純化

抗體是一種特殊的蛋白質(zhì)分子，被用作體外診斷試劑、免疫親和層析的配基等，在生命科學(xué)研究、生物技術(shù)及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中有廣泛應(yīng)用，尤其是抗體作為各種免疫分析的核心試劑，對(duì)免疫分析結(jié)果的靈敏度、特異性起著重要的作用；不論用什么方法產(chǎn)生抗體，都需要在后期對(duì)抗體進(jìn)行分離和純化，所以根據(jù)抗體，選擇合適的分離純化方式是十分重要的。

層析技術(shù)是抗體分離純化的核心技術(shù)，一般采用三步純化策略：粗純、中間純化和精細(xì)純化，其中粗純主要目的是捕獲、濃縮和穩(wěn)定樣品，粗純一般使用蛋白A和蛋白G親和層析，并且一步即可達(dá)到95%以上的純度；中間純化和精細(xì)純化去除特定的雜質(zhì)，如宿主蛋白、DNA、聚集體和變體等，常用的層析技術(shù)有離子交換、疏水層析等，從而達(dá)到最終治療用抗體所需的純度。用凝膠多慮純化抗體時(shí)，將含有抗體的樣品通過(guò)裝有多孔性介質(zhì)填料的層析柱中，收集流出的抗體組分；當(dāng)樣品從層析柱的頂端向下運(yùn)動(dòng)時(shí)，大的抗體分子不能進(jìn)入凝膠顆粒而迅速洗脫，小的抗體分子能夠進(jìn)入凝膠顆粒，其在凝膠柱中的遷移被延緩；抗體分子從凝膠過(guò)濾柱洗脫的先后順序一般是按照分子量的大小由高到低。中凈環(huán)球凈化可提基因工程車(chē)間、GMP車(chē)間的咨詢(xún)、規(guī)劃、設(shè)計(jì)、施工、安裝、改造等配套服務(wù)。

抗體或者抗體片段通常是從天然或重組體系中提取的，來(lái)源的選擇會(huì)影響到樣品處理和純化的步驟，因?yàn)椴煌瑏?lái)源的雜質(zhì)和需要的目標(biāo)分子純度是不同的，通常情況下，會(huì)選擇一個(gè)目標(biāo)分子高度親和的柱子并能夠一步得到高純度的樣品，且盡可能的減少污染；根據(jù)不同的目標(biāo)和條件，可以采用比較適宜的方法對(duì)所要制備的抗體進(jìn)行純化。

本文由中凈環(huán)球凈化CCG(www.fadamy.cn)提供，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處。